如何开发具有光明商业化前景的“现货型”NK细胞治疗
本文节选自对来自Glycostem Therapeutics的科学家的专访，由于水平有限，详细内容，请查看原文。
问：你们现在的主要工作是什么?
现在对于Glycostem来说是一个令人振奋的时刻。我们在5个不同国家的8个临床中心，进行我们的WiNK试验，以治疗AML患者。多年来，我们一直致力于从我们自己的GMP认证生产工厂提供临床试验产品，这涉及到我们所有的部门 - 一个真正的团队工作。目前，我们正在调整生产计划，很快就能够为美国临床试验提供oNKord®。对于一家年轻的制药公司来说，根据美国和欧洲监管标准的相似之处以及同样重要的不同之处开展工作，是非常令人兴奋的。
此外，我们正忙于在临床前试验中优化我们的CAR-NK和TCR-NK产品。我们已经看到了一些非常积极的数据，所以未来看起来很光明。我们的公司已经发展到了50多名员工，因此我们能够不断获得新的灵感，来做得更好、更快。
除了这些有良好前景的产品管线之外，我们还专注于NK细胞联合治疗。这项工作的一个方面是，培养的NK细胞通常只有较少的CD16受体；而激活抗体依赖性细胞毒性(ADCC)需要这种受体，因为这个过程由抗体连接至NK细胞上的CD16受体所介导。2020年12月，我们获得了根特大学 (University of Gent) 的一项技术许可，该技术不仅能在培养后为我们提供大量的CD16受体，而且有可能将我们的生产时间缩短一半。
问：NK细胞治疗领域近年来发展迅速，你们是如何看待该领域当前的高水平投入的?
NK细胞一直在T细胞的“阴影”之下，最近，更受到了CAR-T细胞的影响。然而，行业已经意识到了我们在15年前就已经意识到的一个念头 - 即细胞疗法要实现其成为“重磅药”的潜力，就需要我们使用一种更加通用的方法，将其制备成“现货型”的异体治疗产品，当患者供体匹配或不匹配时，这种产品都能够即取即用，不需要考虑为患者提供“安全”的治疗。
这就是为什么最近有越来越多的NK细胞治疗公司成立。一般来说，它们与Glycostem的不同之处在于，它们要么针对饲养细胞（Feeder Cell）使用较老的细胞培养方法，要么使用IPS源性NK细胞的多种变体。有趣的是，到目前为止并没有很多临床前功能数据被发表，而且通常只需要基因操作就能让NK细胞起作用；我们发表的关于血液病和实体癌的结果表明，优越的杀伤效果也与oNKord®抑制性受体的低表达相关。
我们注意到，并不是每一家NK细胞治疗公司都有一个清晰的想法，即如何通过生产工艺来启动临床试验工作，这些工艺有可能为III期临床试验或以后的临床试验提供物料。我们相信，使Glycostem与这些新入局者相区别的一个主要不同点，是我们更关注于复杂的基因修饰概念，而不是了解NK细胞产品的基本潜力，此外，我们有一个坚实、可升级放大的生产概念，每年可生产超过10k输液剂量。
问：你们能告诉我们更多关于Glycostem NK细胞治疗平台和方法的信息吗?
我们开始开发我们的生产工艺时的目的，是建立一个基于化学限定、无动物源性成分的细胞培养工艺，且不需要复杂的生产步骤，如饲养细胞的诱导。Glycostem的NK细胞生产技术的设计始终铭记制药生产标准和质量控制。它不要求我们将授权的、来自学术界的工艺转化为生产和QC要求。此外，我们的目标始终是拥有一个完全封闭的细胞培养工艺，具有高水平的自动化，以降低劳动力和生产成本。13年前，我们开发了自己的无血清细胞培养基，使创新的细胞培养工艺能够以从脐带血中富集的CD34造血干细胞和祖细胞开始培养NK细胞。为了简化IND和EMA指导的欧洲多中心试验的监管性临床试验启动申报过程，我们选择不使用饲养细胞，因为饲养细胞由于杂质和副作用必然会产生监管挑战。饲养细胞的使用也会不必要地使生产过程复杂化。这些问题是合成性培养基根本不能导致的。最后，但并非最不重要的是，我们开发了一个封闭的生产系统，稍加调整，就可以生产非操纵和操纵产品 - 这给了我们整体上的生产灵活性。最重要的是，小而明确定义的生产工艺足迹允许实现强大的规模放大，以服务于药物细胞治疗生产的需求。
好处是多方面的。例如，我们是世界上最早拥有真正“现货型”细胞治疗产品的公司之一，不需要HLA匹配或不匹配，产品没有已知的严重副作用，生产成本将允许实现高市场渗透率。
问：利用脐带血细胞来源的考虑因素是什么?
首先，我们希望有一种有效的产品，能够对肿瘤产生真正的影响。经过针对多种选择的研究，我们在几年前选择了脐带血。脐带血干细胞来源的NK细胞具有独特的表型，与其它NK细胞 (如来自外周血的活化NK细胞) 相比，也具有优越的细胞溶解特性。对于此类细胞，全球有稳定的供应，我们已经启动生产过程的CD34+干细胞生长迅速，具有高效力。我们可以从一家供应商获得足够的脐带血来生产2500万剂CAR-NK产品；所以我们确信我们有足够的供应。
问：COVID-19大流行如何以及在哪些方面对Glycostem的临床开发和供应链产生了影响?你们从这次“压力测试”中学到哪些重要的经验?
由于COVID-19，我们的一些项目通常推迟了几个月。我们的生产出现了供应问题，这推迟了我们临床试验的开始。即使在今天，我们也看到那些声称参与COVID-19工作的公司获得了供应优先，这使得重新储备一次性使用产品变得更加困难。考虑到这一点，我们增加了库存水平和原材料采购选择。我们预计COVID-19不会造成更多延误。
我们已经了解到，对于“现货型”异体治疗产品，当最终药品有库存时，其对供应挑战不那么敏感。
问：Glycostem的下一代CAR - NK细胞疗法进入临床并取得进展时，在战略层面上的关键考虑是什么?
CAR-NK细胞疗法应该是现成的、低温保存的产品，提供足够的库存，以满足临床试验的需要。CAR-NK应该结合自然NK细胞的功能和CAR介导的特异性。靶点的选择是基本条件，以针对肿瘤抗原提供所需的特异性和广泛的覆盖面。Glycostem已经通过与一个具有丰富经验的NK细胞和肿瘤科学家团队合作，作出了它的靶点选择。
进入临床后，需要确保产品的可用性、安全性和有效性。在I期试验之后不久，生产过程的可放大性将再次成为关键。
问：从更技术/科学的层面上讲，您认为NK细胞治疗未来会出现哪些发展趋势?
我们已经看到了不需要饲养细胞或肿瘤细胞系的新方法。生产平台需要规模放大至每年可治疗数千名患者，且需要使具有高度自动化水平的封闭式系统成为标准。工程平台将允许针对多个患者提供产品批次，并将维持原代NK细胞的广泛功能特性。基因工程平台将更具成本效益，可以在控制医疗成本的同时，为更多的患者生产细胞治疗产品。基因工程平台也将使我们能够充分利用嵌合抗原受体和细胞因子等调节蛋白的潜力。
我们预计，我们也将能够结合具有高度特异性的T细胞受体与异体NK细胞的潜力，以覆盖几乎所有相关的肿瘤相关抗原及其突变。联合治疗 (NK细胞和抗体，NK细胞和常规药物)将有一个坚实的技术平台，并将克服行业内合作和授权方法的挑战（非技术）。
问：考虑到当前该领域技术和监管的快速演变，Glycostem是如何寻求在其研发和生产/供应链模式中建立灵活性的?
如前所述，Glycostem正在构建诸如封闭式生产系统的平台。我们将这一理念贯彻到了我们的CAR-NK/TCR-NK研究中，这样，一旦我们有了一个合适的解决方案，我们就可以轻松地扩展到更多产品的研究和开发中去。我们的封闭式生产系统就是一个完美的例子；我们可以用它来生产所有的产品 - 原材料、一次性使用耗材和设备都是一样的。这也将允许我们的法规事务部门能够从非操纵到操纵的产品应用中回收报告和数据包。总的来说，资源的高利用率将节省时间和金钱。
我们正与在其特定领域处于技术前沿的合作伙伴密切合作，逐步改进我们的平台。平台技术将允许我们进行多次迭代和运行，针对特定的规模、监管和临床阶段，始终使用最佳的选择。数据和过程控制的信息技术是改进策略的一部分。
问：对于商业化，你们现在采取的最重要的准备步骤是什么?特别是考虑到目前开发时间往往被大大缩短的情况?
有条件的批准预计在2023年末，我们需要考虑如何满足对我们产品的需求。为此，我们一直在与一家咨询公司合作，帮助我们了解实现这一里程碑需要的时间和资金。完成这些工作，公司将雇佣更多的员工，对他们进行培训，等等。
我们现在的每个生产批次都能获得最佳的结果，实现了批次的规模放大，提高了自动化水平，使文件审查和批准更有效，并可生成工艺验证和扩展分析验证的性能数据。
问：最后，你们能总结介绍一下未来12-24个月的主要目标和优先事项吗?
在生物技术领域，你需要不断筹集资金，所以这是一个重复的优先事项，但随着临床试验的进行和更多的适应症的到来，临床开发扮演着越来越重要的角色。生产和质量也是如此，其可确保我们有能够治疗患者的产品。展望未来，我们需要利用NK细胞的独特特性，确保我们处于领先的地位。
我们希望看到第一个NK细胞治疗产品接近获批，并可用于所有需要它的患者。我们希望看到细胞疗法开始作为一种标准疗法而被使用，患者开始使用现货型CAR方法治疗。1998年，我们偶然发现了NK细胞，我们一直与许多优秀的合作伙伴合作，分享NK细胞可获得积极治疗效果的愿景 - 所以我们希望看到这一切发生，为我们所有人：为患者和医疗体系。
原文：J.Spanholtz,T.Jordansen, V.Huppert, A bright commercial future for off-the-shelf NK cell therapy. Cell & Gene Therapy Insights 2021; 7(5), 395–405.
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