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呜呜~~ 我被小白鼠咬了!!!谁能告诉我怎么抓小鼠?

2017-04-21 黄安玲 邦耀实验室
导语
与小白鼠相生相杀的日子,被咬伤出血真是一件很让人抓狂的事,不只是影响着身体健康。所谓一朝被蛇咬,十年怕井绳,心里的恐惧还会延误我们的课题,关乎着毕业。不懂人情世故的小编也难逃此劫,回看过去几篇文章,其实小鼠性情温顺还挺可爱的,原来它咬伤我,在于我还不懂她……


因此,在日常实验中,我们应该读懂小鼠,站在小鼠的角度理解她,在不使她产生痛苦、符合生理特性、减少应激的基础上操作,就会避免很多不必要的麻烦。下面咱们就从最基础也最重要的小鼠抓取与固定说起,给大家介绍一下在小鼠实验中最常接触到的几种实用技能(小鼠的抓取与固定;给药方式),助你以后的实验得心应手起来!


一、抓取与固定 


很多实验如小鼠给药,采血等,均需要将小鼠固定住才可进行操作,因此规范准确地抓取动物是实验的前提,既能避免动物咬人,也更便于我们实验操作。对于一般简单实验,双手就是最好的固定的工具。


1. 抓取步骤


① 右手提起小鼠尾巴,将其放在鼠笼盖或其他粗糙表面上

② 小鼠向前挣扎爬行时,再用左手拇指和食指抓住鼠耳和颈部皮肤(如下图)


 

③ 小鼠于左手心中后,用左手的无名指和小指夹其背部皮肤和尾部(如下图)



应用:一些简单的操作如小鼠灌胃、皮下注射、腹腔注射、肌内注射、剪毛等


注意


①小鼠体型虽小但非常灵活,抓取时避免咬伤一定要又稳又准

② 抓尾巴时,应抓取小鼠尾巴的中部或根部,捏住尾端可能损伤小鼠

③ 由于小鼠一直在活动,一次没抓好时要放开重新抓,不要急于下一步操作


2. 固定


进行解剖、手术、心脏采血和尾静脉注射等操作时(必要时先行麻醉),需做一定形式的固定。如尾静脉注射或采血时:如下图为小鼠固定器和尾静脉注射。


第一步:打开尾盖,手提起小鼠尾巴,让动物头对准鼠筒口并使其本能的爬入固定器内;

第二步:调节小鼠固定器的长短,留出尾巴即可进行操作。


小鼠固定器


尾静脉注射的小鼠固定

 

如果需要解剖或者心脏注射时:

① 麻醉小鼠

② 处于背卧式后再用大头针(或者固定胶布)将鼠前后肢依次固定在蜡板上再进行操作。

应用: 对小鼠的解剖、手术和心脏采血等操作


二、小鼠常用给药方法  


进行药物治疗时,为了达到安全合理用药,必须根据治疗目的选择适当的给药途径。接下来介绍一下常用到的小鼠给药途径的操作方式及各自特点。

因药物性质和给药目的不同,动物实验中大概分为以下三种给药方式:


1. 小鼠自动摄入 

2. 灌胃

3. 注射给药(皮内注射、皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、静脉注射、脑内注射等)

 

1. 小鼠自动摄入 


一般是将药物掺入饲料或者饮水中,使动物自动摄入

优点:操作简单方便

缺点:剂量不能准确掌握,且动物个体间服药量差异较大


2. 灌胃


药物经口腔、食管直接送入胃中,要经过消化过程才能进入体循环,再到血液发挥作用。多用于急性试验中的经口给药法


操作方法


①抓取小鼠,头部向上,头向后仰使口腔和食管呈直线

②右手持注射器(一般用1ml的注射器配灌胃针头),从一侧口角进针,沿着上颚推至后头,以针头轻压舌根

③灌胃针前端顺利进入食管后,缓慢推进,插入针时应无阻力;


若感到阻力或动物挣扎时,应立即停止进针或将针拔出

参考给药量:小鼠0.1ml/10g体重,最大不超过0.5ml/10g体重

优点:剂量准确,是常用,比较安全、方便经济的给药方法,

缺点:吸收不恒定,误差较大。如某些药物因本身的被物理性质而不能吸收;


有些药物对胃粘膜有刺激作用可引起呕吐;药物与食物同时存在时,吸收会有影响


3. 注射给药(通过注射的方式,使药物吸收)


优点:剂量准确,作用快,是动物实验中常用的给药方法

缺点:操作比较复杂,安全性较低、风险较大

根据注射位置分为多种注射方式。为了便于理解,首先了解一下皮肤构造,


如下图:依次是表皮、真皮、皮下组织和肌肉层。



注射给药中,根据实验目的,主要分为以下几种:


1. 皮内注射


将药物注射于表皮与真皮之间(结合上图),紧贴皮肤表层刺入皮内,针头与皮肤呈10-15°角先刺入皮下,针头向上挑起进入皮内再稍刺入,推出药夜,见皮肤表面鼓起小皮丘,若皮丘不很快消失,证明药液在皮内。一般选择小鼠背部脊柱两侧皮肤进行注射


特点:适用于皮肤过敏试验,观察皮肤反应

参考给药量:小鼠每次每点不超过0.05ml,两点间隔1cm以上

 

2. 皮下注射


将药物注射于皮下,提起注射部位皮肤使皮下形成空隙,将注射针沿皮肤推进5-10mm,若针头可轻松左右摆动,表明针头在皮下,轻轻抽吸无回流物,则可注入药物,拔出针后应按压针刺部位,防止药液外漏和促进药物吸收,一般选择小鼠的背部


特点:皮下注射的吸收速率通常均匀而缓慢,因而作用持久;仅适用于对组织无刺激性的药物,否则可引起剧烈疼痛和组织坏死

参考给药量:小鼠0.1~0.3ml/10g体重

 

3. 肌肉注射


将针头刺入大腿外侧肌肉,注射时垂直迅速刺入肌肉,回抽针栓如无回血,将药物注入。一般选肌肉发达,无大血管通过的部位,多选臀部


特点:药物水溶液肌肉注射时吸收十分迅速,适用于油溶液和某些刺激性物质

参考给药量:小鼠给药量每次小于0.05-0.1ml

 

4. 腹腔注射


抓取小鼠,使其腹部朝上头部略向下垂,抓紧背部皮肤使使腹部皮肤紧绷,于腹中线一侧刺入皮下,在皮下平行腹中线推进针头3-5mm,再以45°角向腹腔内刺入,当针尖通过腹肌后,抵抗力消失,回抽无回流物,缓慢推入药物。


特点:是很常见的给药方式,注射剂量大,注射后腹膜能力吸收强;尤其是在麻醉时,最常见的麻醉方法就是麻醉药物腹腔注射

参考给药量:每次给药量小鼠0.2-0.8ml


5. 静脉注射


小鼠一般采取尾静脉注射方式,鼠尾静脉有三根,左右两侧及背侧各一根,一般选择左右两侧尾静脉,先距尾尖1/3处先缓注少量药液,如无阻力,表示针头已进入静脉,可继续注入。


特点:将药物直接输入血液,没有消化过程,药物直接到达循环系统,药效迅速可靠。但由于高浓度的药物迅速到达血浆和组织,增加了发生不良反应的危险性。反复注射还有赖于持续保持静脉通畅。不适用于油溶液或不溶性物质。

参考给药量:0.05ml - 0.1ml/10g



6. 脑内注射


一手拇指和食指抓住动物两耳后的头皮固定头部,使注射针头和额顶颅骨呈45°角,在中线外侧2mm处刺入,注射速度一定要慢,避免引起颅内压急遽升高


特点:多在微生物学动物实验

参考给药量:每次低于0.03ml

 

7. 其他注射


除了上述常见的几种注射给药方式外,根据你的实验目的,还有其他注射方式,如心室注射等,这里就不在赘述了。

 

小鼠的固定不仅仅是为了避免我们被咬伤,更是很多实验操作成功的前提,所以我们一定要熟练掌握。另外,在小鼠的各种给药方式中尾静脉注射难度是最大的,相信困扰了很多人,下一期我们将为大家详细介绍尾静脉注射秘诀,并附上最全面最专业的视频教材,一定不要错过哦!


精彩内容列表(持续更新)

模式动物系列(—)小鼠基本信息

1.1 常见大小鼠品系

1.2 如何进行小鼠科学地饲养

1.3 小鼠的一生及繁育过程

1.4 ICR小鼠绝美写真

1.5 小鼠隔离与净化

1.6 常见小鼠实验操作技能(小鼠的抓取与固定、给药方式等)


2. 模式动物系列(二)基因编辑鼠

2.1  基因编辑鼠的构建

2.2  gRNA设计和筛选

2.3  sgRNA表达载体构建

2.4  显微注射操作步骤及要点

2.5  小鼠培育及繁殖过程

2.6  小鼠基因型鉴定

2.7  小鼠保种方式(精子、胚胎冻存)

2.8  小鼠体外受精介绍


3. 模式动物系列(三)疾病动物模型

3.1 疾病动物模型基本介绍

3.2 免疫缺陷动物

3.3 人源化动物

3.4 肿瘤动物模型介绍

3.5 肿瘤模型之生长、转移及复发模型

3.6 免疫疗法相关肿瘤模型介绍


4.  实践中的实验动物福利和伦理

4.1 Nature论文险被撤稿,你的动物实验合乎动物福利和伦理吗?


5. 小鼠命名规则

5.1 常见小鼠命名规则

5.2 基因工程鼠命名规则(上)——定点突变小鼠

5.3 基因工程鼠命名规则(下)——转基因小鼠


6. 代谢综合征动物模型

6.1 糖尿病动物模型综述

6.2 1型糖尿病动物模型介绍

6.3 2型糖尿病动物模型介绍


7.1 肝损伤动物模型介绍


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