人免疫缺陷病毒（HIV）核酸定量检测
艾滋病，即获得性免疫缺陷综合征，是由人类免疫缺陷病毒（HIV）感染引起的以人体CD4+T淋巴细胞减少为特征的进行性免疫功能缺陷，继发各种机会感染、恶性肿瘤和中枢神经系统病变的一种传染病。
艾滋病的传播方式
HIV虽然有传染性，但传播途径较为严苛，主要包括以下三种传播途径：
1. 性传播：通过阴道交、肛交方式直接与HIV感染者体液接触（精液、阴道分泌物等）
2. 血液传播：⑴输入HIV感染者血液⑵与HIV感染者共用注射器静脉注射吸毒⑶移植HIV感染者的组织器官等
3. 母婴传播：孕期宫内感染、分娩过程中感染和产后因母乳喂养导致感染未接受抗病毒治疗的HIV感染者的血液、精液、阴道分泌物、羊水、脑脊液、胸腔积液、乳汁等具有高度传染性，通常认为鼻分泌物、唾液、痰液、汗液、泪液、尿液、粪便、及呕吐物不具有传染性（除非含有可见的血液）。在日常工作中，接触有传染性的感染者样本时应注意规范操作，做好防护。
艾滋病的症状
急性感染期：在HIV病毒感染后大约2-4周。急性期感染者的血液中存在大量病毒，此期的HIV感染者传染性最强。大多数感染者无特异性症状，临床表现以发热最为常见，可伴有咽痛、盗汗、恶心、呕吐、腹泻、皮疹、关节疼痛、淋巴结肿大及神经系统症状，一般持续1～3周后缓解。部分感染者可出现HIV病毒血症和免疫系统急性损伤所产生的临床表现。
无症状感染期：又称临床潜伏期或慢性感染期。这一时期的HIV感染者仍然没有表现出明显的临床症状，但病毒在体内持续复制生长，逐渐破坏免疫系统。如果不及时治疗，艾滋病病毒感染将对免疫系统造成严重损害，在这一阶段的后期出现艾滋病相关症状。无症状感染期通常可持续8-10年，处于无症状感染期的HIV感染者同样具有传染性。根据年龄、健康状况等个体差异，部分HIV感染者疾病进展较快，可在1-2年内发展为艾滋病患者，也有少数HIV感染者疾病发展缓慢，临床潜伏期可超过15年。
典型艾滋病期：这一时期是HIV病毒感染的最终阶段，经过8～10年的临床潜伏期，HIV感染者体内病毒不断增加，造成免疫功能严重缺陷，发生各种机会性感染以及肿瘤。如果不及时治疗，这一时期的患者死亡率极高，一般在半年至2年内死亡。
艾滋病的检测
筛查检测
筛查试验是一类用于初步了解受检者血液或体液中有无HIV抗体和/或抗原的检测方法，具有高敏感性，确保检测到样本中的HIV抗体和/或抗原。常用的检测方法包括酶联免疫吸附试验、免疫层析试验、化学发光或免疫荧光试验等。
确认检测
包括抗体确证试验和核酸检测试验。抗体确证试验包括免疫印迹试验、条带/线性免疫试验、免疫层析试验、以及免疫渗滤试验等。核酸检测试验包括核酸定性试验和核酸定量试验。
人免疫缺陷病毒（HIV-1）核糖核酸定量检测
HIV的定量水平与HIV感染后病情发展和预后有密切关系，检测感染者血浆中HIV病毒定量（viral load）对于预测疾病进程、制订治疗方案、监测用药疗效和辅助诊断等均有重要临床参考价值。Xpert HIV-1病毒定量（Xpert HIV-1 VL）检测是依托全自动GeneXpert仪器进行反转录PCR（RT-PCR）的体外测试方法，在40～1×107拷贝（cp）/mL的线性范围内检测血浆中HIV-1RNA含量。具有很高的灵敏度、准确性和稳定性，同时具有操作简单、方便、安全、快捷等优势，对操作场地和人员无需特殊要求，适合临床应用。
临床意义
1.作为补充试验：用于筛查试验有反应但抗体确证试验不确定或阴性样本的判定及疑似艾滋病晚期患者需将核酸检测、临床病史和CD4+T淋巴细胞计数检测结果综合判断。对于抗体筛查试验阴性但免疫功能低下者，也可进行核酸检测，结合临床综合判断。
2.用于急性期（窗口期）诊断：对近期有明确流行病学史的个体，如抗体筛查试验无反应，可通过核酸检测判定是否为急性期感染。核酸检测结果阴性或低于最低检测限不能排除HIV-1感染。
3.HIV-1暴露婴儿感染早期诊断：HIV-1感染母亲所生小于18个月龄的婴儿，不同时间的两次HIV-1核酸检测均为阳性即可作出诊断。18个月龄以上儿童诊断与成人相同。
4. 抗病毒治疗效果监测：HIV感染者和艾滋病病人经抗病毒药物治疗后，定期进行HIV-1病毒载量检测，可判断抗病毒药物治疗的疗效。
标本要求
样本采集、运输和储存应将全血收集在EDTA采血管中，采集8ml全血，无需空腹采集。
● HIV-1 VL检测最少需要1mL血浆。
● 全血样本制备和检测前，可在15-30℃下储存最长8小时，或在15–25℃下储存最长24小时或2-8℃下储存最长3天。
● 离心后，血浆用于检测前可在15-30℃下储存最长 24 小时或在 2-8℃下储存最长6天。
● 血浆样本冷冻（≤-18℃和≤-70℃）保存时可稳定 6 周。
● 血浆样本可在经历最多三个冻／融循环后保持稳定。
● 血浆样本转移至检测匣内之前，必须解冻并平衡至室温。
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