CD40靶点全梳理

▎Armstrong

2020年10月15日，Apexigen宣布其CD40抗体APX-005M治疗胃癌和胰腺癌获得FDA的孤儿药资格认证。Apexigen最初由Epitomics分拆而来，Epitomics成立于2001年，由华人科学家朱伟民与余国良共同创立。

早年，CD40靶点的药物开发多集中于接抗性抗体用于治疗自身免疫病，近年来重心则转向激动剂抗体用于肿瘤治疗。

Apexigen的APX-005M为CD40赛道的领先在研药物，抗肿瘤活性很强，其中原因之一是Fc进行了改造。

FcγRIIB介导的Cross-linking

Apexigen的APX-005M采用IgG1亚型，引入了S267E突变增强FcγRIIB亲和力，进而增强cross-linking效应。

近年来多个独立研究都发现FcγRIIB介导的cross-linking对CD40激动剂抗体的抗肿瘤活性非常重要，包括百时美施贵宝等的研究。

如百时美施贵宝的研究中构建了一系列突变体，增强FcγRIIB的亲和力，包括SELF（S267E/L328F）、SE（S267E）、V9（G237D/P238D/P271G/A330R）、V11（G237D/P238D/H268D/P271G/A330R）等。

FcγRIIB亲和力最强的V11，其抗肿瘤活性也是最强的。

Apexigen的APX-005M通过引入S267E、艾伯维的CD40抗体Giloralimab通过引入V273E突变，增强FcγRIIB的亲和力。S267E/L328F最初由Xencor在2008年发明，将V273则由艾伯维发明。礼进生物的xLinkAb技术通过S267、V273、L328、P329突变，增强FcγRIIB亲和力。上个月，礼进的CD40抗体LVGN7409获得FDA批准临床。

IgG亚型：铰链区越灵活，抗肿瘤活性越弱

除FcγRIIB介导的Cross-linking之外，IgG的铰链区对于CD40抗体的激动剂活性也至关重要。今年5月，Cancer cell期刊发表了南安普顿大学科学家的研究文章，发现IgG亚型转换可将CD40拮抗剂抗体转变为激动剂抗体。

对于Bleselumab、Ravagalimab、Iscalimab等CD40拮抗剂抗体，转变为IgG2亚型时，响应抗体则转变为CD40激动剂抗体。

进一步地，研究人员发现IgG2铰链区的刚性是决定激动剂活性的关键。

去年Nature communication期刊上发表国内科学家的一篇文章，同样发现CD40抗体的铰链区刚性对于激动激活性至关重要。

双抗：PD-L1、4-1BB、间皮素等与CD40组合

一些药企同时在积极开发CD40双抗，如艾伯维的间皮素/CD40双抗ABV-428，CD40的激活依赖于间皮素的结合，一方面可以保证安全性，另一方面间皮素结合有助于促进Cross-linking。

国内药企也多有布局CD40抗体或双抗，恒瑞医药、礼进生物、百奥赛图的单抗已经进入临床阶段，另外天广实在开发PD-L1/CD40双抗，普米斯生物与Alligator合作开发三款双抗（可能包括CD40双抗）。

总结

免疫检验点激动剂抗体的开发更为复杂，抗体亚型（铰链区）、FcγRIIB介导的Cross-linking、表位等可能都对激动激活性有影响。4-1BB抗体、CD40抗体、OX40抗体等，激动剂活性的评估在抗体药物研发的过程中非常重要。吉满生物的NFKB Reporter Jurkat细胞系以 Jurkat为工具细胞，采用慢病毒感染的方式，构建稳定表达人源CD40受体及 NFKB Luciferase报告基因的细胞系。CD40激动剂的生物活性可以通过 NFKB通路活化产生的萤光素酶定量。该细胞系可以用于CD40激动剂抗体的开发。

此外，吉满生物还有4-1BB抗体的NFKB Reporter Jurkat细胞系。

参考文献

• Complex interplay between epitope specificity and isotype dictates the biological activity of anti-human CD40 antibodies(2018)；

• Isotype Switching Converts Anti-CD40 Antagonism to Agonism to Elicit Potent Antitumor Activity（2020）；

• CD40 agonist antibodies in cancer immunotherapy(2020)；

• Concepts for agonistic targeting of CD40 in immuno-oncology(2019)；

• Fc Engineering Approaches to Enhance the Agonism and Effector Functions of an Anti-OX40 Antibody（2016）；

• Human immunoglobulin G hinge regulates agonistic anti-CD40 immunostimulatory and antitumour activities through biophysical flexibility(2019)；

• Interaction with FcgRIIB Is Critical for the Agonistic Activity of anti-CD40 antibody(2019)；

• Sufficiency of CD40 activation and immune checkpoint blockade for T cell priming and tumor immunity(2020)；

• Therapeutic Activity of Agonistic, Human Anti-CD40 Monoclonal Antibodies Requires Selective FcγR Engagement(2016)、

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