收藏|溶瘤病毒VSV文献解读及知识拓展

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本文转载自复百澳生物

2019年8月27日/医麦客 eMedClub/--溶瘤病毒的种类较多，除了我们熟悉的溶瘤腺病毒和疱疹病毒外，还有痘病毒、呼肠孤病毒和水泡性口炎病毒等。本月有多篇关于水泡性口炎溶瘤病毒（Vesicular Stomatitis Virus）的研究论文发表。本期将解读以下3篇文章并拓展VSV溶瘤病毒的相关知识。

02

第 1 篇

VSV-PD-L1-scFv 肿瘤免疫治疗

近期，来自苏州大学 熊思东团队在Cellular & Molecular Immunology杂志上发表研究论文《A novel oncolytic virus engineered with PD-L1 scFv effectively inhibits tumor growth in a mouse model》，作者选用溶瘤病毒VSV^M51R-PD-L1-scFV对肺腺癌（LLC细胞株）和黑色素瘤（B16细胞株）肿瘤小鼠模型进行治疗。结果表明与VSV^M51R治疗组相比，VSV^M51R-PD-L1-scFV治疗组小鼠的存活率和存活时间均显著提升。

为了进一步研究溶瘤病毒VSV^M51R-PD-L1-scFV治疗后的抗肿瘤记忆免疫效果，被治愈的小鼠再次进行LLC肿瘤细胞接种时，6只小鼠中仅有一只在腹股沟中生长出了肿瘤,在接种后的30天后仅增长到136mm³。

与未处理组相比，VSV^M51R-PD-L1-scFV治愈的小鼠脾脏中CD8 central memory(CD44 + CD62L + ) T细胞和CD8/CD4 effector memory(CD44 + CD62L − ) T 细胞的总数显著增加。此外,治愈的小鼠的脾脏中IFN-γ + CD8 T细胞表达量也增加。也即，表明这些小鼠获得了长期抗肿瘤的免疫效果。

01

第 2 篇

VSV-M51R免疫治疗结肠癌

Stewart JH 研究团队，在结肠癌腹膜表面肿瘤小鼠模型中研究溶瘤病毒VSV^M51R的作用效果和免疫调节机制。研究结果表明，VSV^M51改变了结肠癌腹膜表面肿瘤的先天性和适应性免疫反应。
实验方法：1. 在BALB/C小鼠中建立CT26-Luciferase腹膜肿瘤,在肿瘤植入后5 d，小鼠腹腔注射磷酸盐缓冲盐水（n=10）或5×10⁶ PFU的VSV^M51（n=10）;2. 在60天的研究期间，每隔3天测量一次肿瘤生物发光。并在VSV^M51治疗后第1、3和7天收集腹腔灌洗液并对其进行分析。
实验结论：与对照组相比，单次腹腔注射VSV^M51溶瘤病毒可抑制结直肠癌的生长，导致腹膜CD4+T 和B1B细胞量显著升高，同时骨髓源性抑制细胞减少；经VSV^M51溶瘤病毒处理的腹腔也含有较低浓度的免疫抑制单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和白细胞介素6细胞因子(IL-6)。

01

第 3 篇

核糖开关调控VSV溶瘤病毒

基于小分子自切核酶（aptazymes）的合成核糖开关嵌入未翻译区域（UTRs），实现了对哺乳动物细胞基因表达的化学控制。
通过在病毒基因和转基因的3′UTRs中插入鸟嘌呤激活的核酶，在鸟嘌呤存在下，VSV载体在哺乳动物细胞中的GFP表达被抑制了26.8倍。此外，我们通过在12天的时间内从培养基中添加和提取鸟嘌呤，证明了转基因（分泌的纳米Luc）的可逆调节。总之，我们的核糖开关控制的VSV载体允许在哺乳动物细胞中稳定、长期和可逆的基因表达调控，且无病毒基因组整合风险。

基础拓展

Vesicular Stomatitis Virus

水泡性口炎病毒（VSV）是一种弹状病毒，由负义，单链RNA基因组编码的5个基因组成。在自然界中，VSV感染昆虫和家畜，引起相对局部和非致命的疾病。这种病毒的低致病性很大程度上归因于其对干扰素（一类在感染期间释放到组织和血液中的蛋白质）的敏感性。这些分子激活遗传的抗病毒防御程序，保护细胞免受感染，防止病毒传播。在2000年，Stojdl，Lichty等证明这些途径中的缺陷使癌细胞对干扰素的保护作用不响应，因此对VSV感染高度敏感。由于VSV经历快速的细胞溶解复制周期，所以感染导致恶性细胞死亡，（文献：DOI:10.1038/77558）。
VSV因此非常适合于治疗应用，并且几个研究组已经证明全身使用的VSV可以被递送到肿瘤部位，在那里它复制并诱导疾病消退，导致肿瘤持久性的治愈。
通过改造基质蛋白Met-51的缺失来减弱病毒，几乎消除了其对正常组织的感染，而对肿瘤细胞的感染和复制不受影响。最近的研究表明，这种病毒具有治疗脑肿瘤的潜力，这要归功于其溶瘤性质。行业动态

2018年9月13日，Boehringer Ingelheim（BI）宣布2.1亿欧元收购Vira Therapeutics全部股份。Vira Therapeutics是一家专注于溶瘤疗法的生物医药公司，开发了溶瘤病毒候选药物VSV-GP（水疱性口炎病毒）。VSV-GP不产生病毒中和性抗体，因此可实现静脉给药。此外VSV-GP具有复制周期短，易于获得满足临床需求的高滴度病毒；在大部分人中无预存免疫；不整合人类DNA的优点，因此成为具有前景的候选溶瘤病毒。

目前VSV-GP处于临床前阶段，小鼠肿瘤模型研究表明，VSV-GP在脑胶质瘤、卵巢癌、恶性黑色素瘤均显示出抗肿瘤活性。

▲ 图为VSV抗肿瘤机制示意图（图片来自Vira Therapeutics官网）
VSV溶瘤病毒临床实验

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参考文献：

1.DOI: 10.1021/acssynbio.9b00177

2.DOI: 10.1016/j.jss.2019.07.032

3. DOI: 10.1038/s41423-019-0264-7

4.临床试验数据来源：https://clinicaltrials.gov

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